即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和自动2大类,但其作原理基本上都是致的,其核心都是个比色计,即用比色法来行分析。 测定般要求测试液的zui终体积在250μL以下,用般光电比色计无法成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有殊要求。
原理
酶标仪实际上就是台变相光电比色计或分光光度计,其基本作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是种单通道自动样的酶标仪作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成束单色光,入塑料微孔中的待测标本.该单色光分被标本吸收,另分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器行数据处理和计算,zui后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动样检测过程.而另些酶标仪则是采用手移动微孔板行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单.
微孔板是种经事包埋用于放置待测样本的透明塑料板,板上有多排大小均匀致的小孔,孔内都包埋着相应的抗原或抗体,微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.
光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光,400nm~780nm之间的光可被人眼观察到,大于780nm称为红外光。人们之所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收的大分为红橙光和蓝紫光,但对绿色不吸收,反射出来,所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在定波长下,检测被测物的吸光值。
随着检测方式的发展,拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做酶标仪,可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。
酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的意波长,而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片,只能截取定波长行检测。
酶标仪(MicroplateReader)是对酶联免疫检测(EIA)实验结果行读取和分析的业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物行的,反应结果以颜色显示,通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。
酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业、食品和环境中,别在近几年中,由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用,使得酶标仪在生殖保健域中应用越来越广泛,同时促了生殖健康水平提。
目前内许多计生站系统开展了酶免检测项目,如:乙肝五项、艾滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法,报出的结果缺乏的依据。例如:某弓形虫检测试剂盒中,临界值规定为:阴性对照品的OD值×2.5,通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否过临界值。肉眼行两孔之间的颜色可能还行,但孔的颜色是否过另孔颜色的2.5倍就不可能。
内多家机构,如卫生临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性,并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读,酶免试剂的质控也应使用酶标仪,并提供酶标仪测定的原始数据,而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是些实质性的感染和病变(如:肝炎、艾滋病、优生优育等),判读更要求严谨,由误诊引起的纠纷很难处理。另外,住院手术病人术前的丙肝、艾滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的疗事故纠纷的手段,正逐渐被许多单位所采用。
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