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荧光检测器的检测原理

更新时间:2022-05-24      点击次数:7171

荧光检测器是液相色谱仪常用的种检测器。用紫外线照射色谱馏分,当试样组分具有荧光性能时,即可检出。

检测原理

化合物受紫外光激发后,发射出比激发光波长更长的光,称为荧光;

荧光强度 (F) 与激发光强度 (I0) 及荧光物质浓度 (C) 之间的关系为:F=2.3QKI0εCl

F=KC

Q为量子产率,K为荧光效率,ε为摩尔吸光系数,l为光径长度。

定量基础

在光致发光中,发射出的辐射总依赖于所吸收的辐射量。由于个受激发的分子回到基态时可能以跃迁的形式产生能量损失,因而发射辐射的光子数通常都少于吸收辐射的光子数,它以量子效率Q来表示。

在固定的实验条件下,量子效率是个常数,通常Q小于1。对可用荧光检测的物质来说,Q值般在0.1~0.9之间。荧光强度F与吸收光强度成正比。对于稀溶液,荧光强度与荧光物质溶液浓度、摩尔吸光系数、吸收池厚度、入射光强度、荧光的量子效率及荧光的收集效率等成正相关。在其他因素保持不变的条件下,物质的荧光强度与该物质溶液浓度成正比,这是荧光检测器的定量基础。荧光检测器属于溶质型检测器,可直接用于定量分析。


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